南方医科大学学报

作者：李思蒙, 陈建宁, 申思满, 刘望龙, 于丽丽, 张良清

单位：1.澳门科技大学医学部中医药学院，澳门 999078；2.澳门中药机制与质量全国重点实验室，澳门 999078；3.澳门科技大学珠海澳科大科技研究院，广东 珠海 519099；4.广东医科大学附属第二医院，广东 湛江 524000

关键词：丹酚酸B,Sirt1,心肌缺血再灌注损伤,心脏,线粒体功能稳态,

基金：国家自然科学基金(82370281);广东省自然科学基金(2024A1515013119)

目的 探讨丹酚酸B（Sal-B）对缺氧复氧（HR）小鼠HL-1心肌细胞线粒体功能稳态和小鼠心肌缺血再灌注（IR）诱导心肌损伤调控的分子机制。 方法 体外实验：在验证Sal-B对缺氧复氧小鼠HL-1心肌细胞影响的线粒体表型实验中，将细胞分为对照组（Ctrl组）；缺氧复氧组（HR组；缺氧12 h，复氧4 h）；Sal-B预处理组（Sal-B+HR组；5 μmol/L Sal-B，预处理30 min）；敲降对照组（HR+Sal-B+sh-Ctrl组）；敲降Sirt1组（HR+Sal-B+sh-Sirt1组）。采用 ATP检测试剂盒测定HL-1细胞ATP生成能力；Mito-Sox染色测定HL-1细胞线粒体超氧阴离子水平；使用氧耗率OCR检测试剂盒测定HL-1细胞底物氧化水平。体内实验：在验证Sal-B对小鼠在体IR心功能影响的实验中，将36只8~10周龄 C57BL/6J小鼠随机分为3组（12只/组）：假手术组（Sham组）；缺血再灌注组；Sal-B预处理缺血再灌注组（Sal-B+IR；50 mg/kg，IR前24 h尾静脉注射）。在验证Sal-B对Sirt1-cKO小鼠在体缺血再灌注心功能影响的挽救实验中，将60只8~10周龄C57BL/6J小鼠随机分为5组（12只/组）：假手术组；缺血再灌注组（IR组；缺血45 min，再灌注6 h）；Sal-B预处理缺血再灌注组（Sal-B+IR；50 mg/kg，尾静脉注射）；Sirt1敲除对照组（IR+Sal-B+Sirt1f1/fl）；心脏特异性Sirt1基因敲除组（IR+Sal-B+cKO-Sirt1）。采用HE染色观察心肌的组织损伤程度；通过心脏超声评估小鼠的心脏射血分数和短轴缩短率。 结果 Sal-B处理可以明显提高HR条件下的HL-1心肌细胞ATP生成能力（P<0.01）；Sal-B可以降低HR处理的HL-1心肌细胞线粒体超氧阴离子水平（P<0.01）；Sal-B可以提高HR处理的HL-1心肌细胞的耗氧率（P<0.05）。Sal-B处理显著改善IR处理的心肌的组织结构紊乱，小鼠心脏超声结果提示Sal-B可以提高IR小鼠的心脏射血功能（P<0.05）。放线菌酮的使用联合Western blotting分析，以及Sirt1-IP后泛素化的Western blotting分析显示Sal-B明显抑制HL-1心肌细胞Sirt1蛋白降解（P<0.05）。HL-1心肌细胞在加入Sal-B的基础上，敲降Sirt1逆转了Sal-B对HL-1细胞的促进ATP生成作用（P<0.01）；逆转了Sal-B对HL-1细胞的抑制线粒体超氧阴离子水平（P<0.01），逆转了Sal-B对HL-1细胞耗氧率的促进作用（P<0.05）。在小鼠体内注射Sal-B的基础上，Sirt1-cKO组相较于对照组明显逆转了Sal-B的提高IR小鼠的心脏射血功能的作用（P<0.05），Sirt1-cKO组相较于对照组明显逆转了Sal-B的改善IR处理的心肌组织结构紊乱作用。 结论 Sal-B可通过抑制Sirt1蛋白降解从而促进HR处理的HL-1心肌细胞的线粒体功能稳态提升和改善IR小鼠的心功能。

来源：2025年第10期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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