南方医科大学学报

作者：付长龙, 陈若岚, 徐诗淇, 游锦欣, 林晴, 黄艳峰

单位：1.福建中医药大学中西医结合学院中西医结合研究院，福建 福州 350122；2.福建省中西医结合老年性疾病重点实验室，福建 福州 350122；3.福建中医药大学中医骨伤学院，福建 福州 350122

关键词：巴戟天多糖,骨关节炎,退变软骨细胞,细胞焦亡,糖酵解,lncRNA XIST,

基金：国家自然科学基金(82474532);福建省中青年教师教育科研项目(JAT231042);福建省自然科学基金(2024J01138);福建中医药大学校管课题(X2023024)

目的 探讨巴戟天多糖（MOP）延缓骨关节炎（OA）软骨细胞退变的作用机制。 方法 提取4周龄C57BL/6小鼠软骨细胞，经纯化培养、鉴定后，采用白介素-1β（IL-1β）诱导软骨细胞退变模型，随机将细胞分为对照组、IL-1β、MOP-L（1、2、4、6、8、10 mg/mL）组，通过CCK-8法筛选MOP最佳干预条件；Western blotting检测MOP不同剂量对丙酮酸激酶M2（PKM2）、半胱天冬酶1（caspase-1）和消皮素D（GSDMD）的蛋白表达；采用荧光原位杂交技术（FISH）法观察各组软骨细胞中lncRNA XIST的表达；对lncRNA XIST进行过表达与敲减，随机将细胞分为Control、IL-1β、IL-1β+MOP、IL-1β+oe/sh-XIST、IL-1β+oe/sh-XIST+MOP组，采用real-time PCR检测各组软骨细胞糖酵解调控因子葡萄糖转运体1（GLUT1）、己糖激酶2（HK2）、PKM2、乳酸脱氢酶A（LDHA）、6磷酸果糖2激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（PFKFB3），焦亡调控因子核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3（NLRP3）、caspase-1、GSDMD的mRNA水平；流式细胞术观察各组软骨细胞的凋亡率；甲苯胺蓝染色观察各组软骨细胞糖胺聚糖表达情况；Western blotting检测各组软骨细胞糖酵解和焦亡调控因子蛋白表达。 结果 镜下结果显示，第2代软骨细胞状态良好，II型胶原蛋白染色呈阳性表达，IL-1β诱导后，细胞数量稍减，触角增多并皱缩，II型胶原蛋白着色减少，PKM2、caspase-1和GSDMD蛋白表达增加；当MOP不同剂量干预退变软骨细胞后，其活力值增加，以MOP-M（4 mg/mL）干预24 h最明显，且PKM2、caspase-1和GSDMD蛋白表达降低（P<0.05）。lncRNA XIST主要分布在软骨细胞核中，与对照组相比较，IL-1β组的软骨细胞lncRNA XIST荧光表达增加；与IL-1β组相比较，IL-1β+MOP组和MOP组软骨细胞lncRNA XIST荧光表达减少；与IL-1β+MOP组相比较，MOP组软骨细胞lncRNA XIST荧光表达减少（P<0.05）。lncRNA XIST过表达后促进糖酵解和焦亡相关因子的mRNA及蛋白表达（P<0.05），且与IL-1β刺激具有协同效应。MOP干预可逆转IL-1β或IL-1β+oe-XIST诱导的上述因子表达上调（P<0.05）。当lncRNA XIST敲减后能抑制软骨细胞凋亡和软骨细胞糖胺聚糖的表达，降低糖酵解（HK2、PKM2、PFKFB3）和焦亡（caspase-1、NLRP3、GSDMD）蛋白表达（P<0.05），MOP干预显示出与XIST敲减相似的保护效果，当两者联合使用时效果更明显（P<0.05）。 结论 本研究表明MOP通过靶向lncRNA XIST调控糖酵解-焦亡，显著抑制IL-1β诱导的软骨细胞退变，为OA治疗提供新策略。

来源：2025年第12期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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