南方医科大学学报

作者：徐乔, 李文杰, 张馨月, 陈越, 蒋子通, 李光哲, 严铭铭

单位：1.长春中医药大学药学院，吉林 长春 130117；2.天然植物化妆品和外用制剂吉林省校企联合技术创新实验室，吉林 长春 130117

关键词：白芍提取物,单因素-响应面法,B16细胞,Hacat细胞,抗氧化,美白,

基金：吉林省人参产业技术体系项目(JLARS-2025-040210);吉林省科技发展计划项目(YDZJ202301ZYTS114)

目的 优化白芍提取工艺，建立白芍提取物（BST）多指标含量检测方法，并初步探讨其对小鼠黑色素瘤细胞（B16F10）的酪氨酸酶（TYR）活性抑制作用和对人永生化表皮细胞（HaCaT）中ROS水平的降低作用，并对BST对体内小鼠模型治疗效果进行评估。 方法 以分子对接手段确定潜在TYR抑制剂成分为没食子酸、甘草苷及芍药苷；采用高效液相色谱法（HPLC）建立BST液相图谱，测定3种潜在TYR抑制剂的含量，并进行方法学验证；通过熵权法计算3种潜在TYR抑制剂的含量、TYR抑制活性及DPPH及自由基清除能力的综合评分作为响应值，采用单因素结合响应面分析法考察溶剂配比、液料比、提取时间以及粉碎目数等因素对BST提取工艺的影响，以确定最优提取工艺；通过设置黑色素-酪氨酸酶B16F10细胞实验空白组（正常培养）、模型组（α-MSH处理）、给药组（α-MSH +BST）、Hacat细胞体外抗氧化活性试验空白组［正常培养，模型组双氧水（H2O2）处理）、给药组（H2O2+BST处理）以验证作用机制。通过UVB辐射暴露系统建立小鼠黑色素瘤模型，BST（100、150、200 mg/kg）给予0.2 mL的混悬液灌胃，结合观察实验动物背部皮肤状态、Fontana-Masson银染色结果以及检测血清样本中参与调控黑色素生成、转运或代谢及抗炎相关细胞因子水平指标综合评估BST体内美白作用效果。 结果 分子对接结果显示BST中潜在TYR抑制剂与TYR蛋白结构的残基存在相互作用关系，建立了BST潜在TYR抑制剂的HPLC含量测定方法，方法学验证表明该方法稳定可行；单因素-响应面实验表明BST最优提取工艺为提取溶剂50%乙醇，液料比1∶15，提取时间1h，粉碎目数20目；BST对DPPH自由基以及羟自由基具有直接清除作用，能显著减少细胞中黑色素的形成并提高B16细胞内TYR蛋白的相对含量并降低HaCat细胞中ROS水平，并在体内通过抑制TYR与TNF-α （P<0.01）直接抑制黑色素合成关键酶与间接抗炎的双重美白机制，双向调节色素代谢，有效逆转UVB诱导的皮肤光老化及色素沉着。 结论 基于单因素响应面法优化的BST提取工艺稳定可靠、预测性良好，药理分析研究表明BST的美白作用可能是通过抑制TYR活性和调节氧化应激和炎症通路的双向调节机制而实现的。

来源：2026年第2期

《南方医科大学学报》期刊编辑部

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